VIP標識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 細胞實驗技術 » 正文

瓊脂糖凝膠電泳檢測調(diào)亡細胞

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08
1.用不同方法誘導細胞調(diào)亡后,取106調(diào)亡細胞,置1.5ml離心管中,用PBS洗滌一次。在微量離心機上全速離心5秒鐘,去上清液。加入100μl含5mol/L異硫氰酸胍,100mmol/L 2-巰基乙醇的25mmol/L枸櫞酸鈉緩沖液pH7.0,在旋渦混懸器上混懸20秒鐘,破壞細胞,變性蛋白質。
2.加入50μl含7.5mol/L醋酸氨和0.8mg/ml糖原的水溶液,混勻;加入300μl 100%乙醇,4℃保存過夜。
3.在微量離心機上全速離心30分鐘,去上清液。加入75%乙醇同樣離心洗滌沉淀物2次。用20μl含100μg/ml無DNA酶的RNA酶的TE緩沖液消化RNA,37℃ 30分鐘。加入10μl甘油和少量溴酚藍,直接點樣。
4.用50ml TAE溶解2g瓊脂糖,加入0.25μg/ml溴乙啶。倒板后加樣,用100bp DNA標記物作為標記。25mV電泳過夜。在紫外線下觀察結果。調(diào)亡細胞的DNA呈相差200bp的條帶的梯形圖。
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.152 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M